2024届全国100所名校单元测试示范卷·生物[24·G3DY(新高考)·生物-R-必考-HUN]一试题

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【答案】(I)不能不论农杆菌中是否导入基因D,农杆菌都能在含有该抗生素的培养基上生长(2)2、31、2(3)高渗植物组织培养【解析】(1)根据目的基因的酶切位，点可知，将目的基因导入农杆菌不会破坏农杆菌Ti质粒中的抗生素抗性基因，因此无论农杆菌中是否导入基因D,农杆菌都能在含有该抗生素的培养基上生长，即不能用Tⅰ质粒中的抗生素抗性基因来筛选鉴定已经成功导入基因D的农杆菌。(2)由图可知，基因D含有三个酶切位，点，若要保留tms、tmr,则使用酶2和酶3切割Ti质粒和目的基因，若要剔除tms、tmr,则使用酶1和酶2切割Ti质粒和目的基因。(3)用纤维素酶和果胶酶处理两种细胞获得的原生质体没有细胞壁，为了防止原生质体吸水涨破，应将开白花植株的叶肉细胞和开红花植株的叶肉细胞放入高渗溶液中。由一个细胞直接培育成完整植株采用的是植物组织培养技术，利用的原理是植物细胞的全能性。2.(9分)自然界中的两种微生物，可以通过各自不同的作用将培养液中的葡萄糖转化为维生素C,其过程如图所示。在欧文氏菌中无2,5-DKG还原酶基因，不能将2,5-DKG转化为2-KLG,科学家通过基因工程技术，改造欧文氏菌，使其可产生2-KLG。请回答下列问题：2,5-二酮基-D-葡萄糖酸(2,5-DKG)棒状杆菌欧文氏菌D-葡萄糖2-二酮基-L-古龙酸—→L一抗坏血酸(2-KLG)(维生素C)(1)改造欧文氏菌的过程中，目的基因为。将棒状杆菌的DNA全部提取出来，用适当的限制酶将其切成DNA片段，并导入受体菌的群体中，构成文库。(2)根据酶的来源不同，改造过程中所使用的DNA连接酶有两类，即DNA连接酶和DNA连接酶。(3)利用基因工程技术改造此细菌的基本方法：先用切割目的基因和,然后用DNA连接酶将上述切割产物连接，构成并将其导入受体菌中。(4)一般情况下，不能直接用未经处理的此菌作为受体菌，原因是【答案】(1)2,5-DKG还原酶基因基因组(2)E·coli T4(3)限制酶载体（或质粒）重组DNA分子（或重组质粒）(4)未处理的此菌吸收质粒的能力较弱【解析】(1)据图可知，在改造欧文氏菌的过程中，将棒状杆菌的2,5-DKG还原酶基因导入欧文氏菌中，因此2,5-DKG还原酶基因是目的基因。该基因文库含有棒状杆菌的全部DNA,属于基因组文库。(2)根据酶的来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。(3)利用基因工程技术改造此细菌的基本方法：先用同种限制酶同时切割目的基因(2,5-DKG还原酶基因)和载体，然后用DNA连接酶将上述切割产物连接，构成重组DNA分子，并将其导入受体菌中。(4)未经处理的此菌吸收质粒（外源DNA)的能力弱，因此一般情况下，不能直接用未经处理的此菌作为受体菌，应该用C2+处理此菌，使其变为感受态细胞，使其细胞壁的通透性增大，利于外源DNA进入细胞。·46·