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(4)据图2分析,图中浮游植物生长、发有、繁殖的能量为kJ/(m2·a),第一营养级到第二营养级的能量传递效率约为%《保留整数)。21.(15分)人乳铁蛋白(hL下)是一个大约由700个氨基酸残基构成的、分子量约为80KD的糖蛋白,主要由腺上皮细胞表达和分泌,乳铁蛋白不仅参与铁的转运,而且具有广谱抗菌、抗氧化、抗癌,调节免疫系统等强大生物功能,被认为是一种新型抗菌、抗癌药和极具开发潜力的食品和饲料添加剂。研究人员通过基因工程将hLF基因导人山羊乳腺上皮细胞中,从而获得大量的人乳铁蛋白,具体操作流程如图所示,图中AseI、Nhe1、SalI、BamH1代表相关限制酶的切点,no为新霉素抗性基因,BLG基因为B乳球蛋白基因,GFP基因为绿色荧光蛋白基因。回答下列问题:人乳腺细胞总RNA①,hLF基因BLG基因GFP基因RT-PCRSalI复制原点AeI肌C基因AF基因BamH INheGFP基因pEBL质粒(重组质粒脂质体介导Sal I'H1山羊乳腺pEB质粒上皮细胞终止于neor(1)细胞中RNA结构不稳定很容易被酶分解,因此在提取细胞的RNA时,通常加入,以保护RNA不被破坏。过程①进行RT-PCR过程中,所需要的酶是,所需要的原料是(2)通过①过程获得hLF基因,通常在其两端分别添加上限制酶识别和切割DNA序列,以便pEBL质粒的构建。将hLF基因插人到GFP基因下游的目的是(3)重组质粒中的neo'的作用是,将转染后的山羊乳腺上皮细胞先置于含的培养液中培养,再利用荧光显微镜观察山羊乳腺上皮细胞中是否发绿色荧光,以筛选出转染成功的细胞。(4)转入LF基因的山羊乳腺细胞在体外培养过程中会逐渐衰老死亡,为获得足够数量的人乳铁蛋白,请利用细胞工程技术,设计实验从山羊乳腺细胞中能够获得大量的人乳铁蛋白,写出实验思路:
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